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应用实例
使用本引物库的引物配合对miRNA进行检测,扩增效率高,线性关系好,特异性强
Target:SYBR Green Slope:-3.415 Y-Inter:43.493 R2:0.998 Eff%:96.25
以miRbase Version 18收录的miRNA合成miRNA mimics(2x10^8copies)为模板,经过W66利来·国际miRcute增强型miRNA cDNA第一链合成试剂盒(KR211)合成cDNA,10倍倍比稀释为5个梯度。利用W66利来·国际miRcute增强型miRNA荧光定量检测试剂盒(FP411)和试剂盒中的下游引物以及引物库中的对应上有引物对hsa-miR-205-5p进行荧光定量检测,实验结果显示PCR扩增线性梯度良好,熔解曲线峰形单一特异,标准曲线显示扩增效率达96.25%。
本引物库的引物经过反复验证分辨率高,对相似度极高的miRNA家族也能很好进行检测
sss